大鼠组织因子（TF）ELISA试剂盒

产品名称：大鼠组织因子(TF)ELISA试剂盒

 操作步骤
1.标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL；。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl（样品终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.加酶：每孔加入酶标试剂 100μl，空白孔除外。
4.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 60 分钟。
5.配液：将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 20 倍稀释后备用。
6.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。
7.显色：每孔先加入显色剂A 50μl，再加入显色剂B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
8.终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
9.测定：以空白孔调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

计算：
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

大鼠组织因子(TF)ELISA试剂盒