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简要描述:青旗(上海)生物技术发展有限公司,总部位于上海浦东新区,依托本地高校资源,逐步发展成为以生物技术为主的研发、生产、培训为一体的综合化产业平台,在标准化细胞库建立及细胞药物前端模型方面成果显著。公司生产经营原代细胞、细胞系、ELISA试剂盒、感受态细胞和HPLC检测等科研产品与服务。我们秉承对用户负责的态度,以对科研的高度严谨,以严格的质量控制,为广大生物医学科研用户提供更优质的服务!
更新时间:2021-05-21
厂商性质:生产厂家
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品牌 | 其他品牌 | 货号 | BFN60804796 |
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规格 | T25培养瓶x1 1.5ml冻存管x2 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 仅供科研 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
细胞名称 | 人肥大细胞LAD2 | ||
货物编码 | BFN60804796 | ||
产品规格 | T25培养瓶x1 | 1.5ml冻存管x2 | |
细胞数量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存温度 | 37℃ | -198℃ | |
运输方式 | 常温保温运输 | 干冰运输 | |
安全等级 | 1 | ||
用途限制 | 仅供科研 1类 |
培养体系 | DMEM高糖培养基+10%FBS+1%三抗 | ||
培养温度 | 37℃ | 二氧化碳浓度 | 5% |
简介 | 人肥大细胞LAD2取自男性供体 | ||
注释 | Characteristics: KITLG dependent. Doubling time: ~14 days (DOI=10.1016/j.jaci.2018.12.550). Derived from sampling site: Bone marrow. | ||
STR信息 | / | ||
参考文献 | PubMed=12801524; DOI=10.1016/S0145-2126(02)00343-0 Kirshenbaum A.S., Akin C., Wu Y., Rottem M., Goff J.P., Beaven M.A., Rao V.K., Metcalfe D.D. Characterization of novel stem cell factor responsive human mast cell lines LAD 1 and 2 established from a patient with mast cell sarcoma/leukemia; activation following aggregation of FcepsilonRI or FcgammaRI. Leuk. Res. 27:677-682(2003)
DOI=10.1016/j.jaci.2013.12.226 Kirshenbaum A.S., Petrik A., Walsh R., Vepa S., Metcalfe D.D. Worldwide impact Of LAD2 mast cell line on mast cell biology research. J. Allergy Clin. Immunol. 133 Suppl. 1:AB57-AB57(2014)
PubMed=25195635; DOI=10.1159/000365729 Kirshenbaum A.S., Petrik A., Walsh R., Kirby T.L., Vepa S., Wangsa D., Ried T., Metcalfe D.D. A ten-year retrospective analysis of the distribution, use and phenotypic characteristics of the LAD2 human mast cell line. Int. Arch. Allergy Immunol. 164:265-270(2014)
DOI=10.1016/j.jaci.2018.12.550 Kirshenbaum A.S., Yin Y., Sundstrom J.B., Bandara G., Metcalfe D.D. Characterization and comparison of human LAD1 mast cells with human LAD2 mast cells. J. Allergy Clin. Immunol. 143 Suppl. 1:AB180-AB180(2019)
PubMed=31698677; DOI=10.3390/ijms20225520 Kirshenbaum A.S., Yin Y., Sundstrom J.B., Bandara G., Metcalfe D.D. Description and characterization of a novel human mast cell line for scientific study. Int. J. Mol. Sci. 20:5520.1-5520.9(2019) |
验收细胞注意事项
1、收到人肥大细胞LAD2,请查看瓶子是否有破裂,培养基是否漏出,是否浑浊,如有请尽快联系。
2、收到人肥大细胞LAD2,如包装完好,请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,出现此状态时,请不要打开细胞培养瓶,应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止 3-5 小时左右,让细胞先稳定下,再于显微镜下观察,此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁,请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。
3、收到人肥大细胞LAD2后,请镜下观察细胞,用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多,请离心收集细胞,接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液,使用新鲜配制的培养基,使用进口胎牛血清。刚接到细胞,若细胞不多时 血清浓度可以加到 15%去培养。若细胞迏到 80%左右 ,血清浓度还是在 10%。
4、收到人肥大细胞LAD2时如无异常情况 ,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养基吸出,留下 5-10ML 培养基继续培养:超过 80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液,1000 转/分钟离心 3 分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
5、将培养瓶置于 37℃培养箱中培养,盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里,存放于 4℃冰箱,以备不时之需。
6、24 小时后,人肥大细胞LAD2恢复并贴满瓶壁,即可传代。(贴壁细胞)将培养瓶里的培养基倒去,加 3-5ml(以能覆盖细胞生长面为准)PBS 或 Hanks’液洗涤后弃去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化,消化时间以具体细胞为准,一般 1-3 分钟,不超过 5 分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁,见细胞脱落下来,加入 3-5ml 培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之*脱落,然后将溶液吸入离心管内离心,1000rpm/5min。弃上清,视细胞数量决定分瓶数,一般一传二,如细胞量多可一传三,有些细胞不易传得过稀,有些生长较快的细胞则可以多传几瓶,以具体细胞和经验为准。(悬浮细胞)用移液管轻轻吹打瓶壁,直接将溶液吸入离心管离心即可。
7、贴壁细胞 ,悬浮细胞。严格无菌操作。换液时,换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液,37℃,5%CO2 培养。
特别提醒: 原瓶中培养基不宜继续使用,请更换新鲜培养基培养。