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简要描述:青旗(上海)生物技术发展有限公司,总部位于上海浦东新区,依托本地高校资源,逐步发展成为以生物技术为主的研发、生产、培训为一体的综合化产业平台,在标准化细胞库建立及细胞药物前端模型方面成果显著。公司生产经营原代细胞、细胞系、ELISA试剂盒、感受态细胞和HPLC检测等科研产品与服务。我们秉承对用户负责的态度,以对科研的高度严谨,以严格的质量控制,为广大生物医学科研用户提供更优质的服务!
更新时间:2021-05-27
厂商性质:生产厂家
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品牌 | 其他品牌 | 货号 | BFN607200613 |
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规格 | T25培养瓶x1 1.5ml冻存管x2 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 仅供科研 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
细胞名称 | 人胰岛细胞NES2Y | ||
货物编码 | BFN607200613 | ||
产品规格 | T25培养瓶x1 | 1.5ml冻存管x2 | |
细胞数量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存温度 | 27℃ | -198℃ | |
运输方式 | 常温保温运输 | 干冰运输 | |
安全等级 | 1 | ||
用途限制 | 仅供科研用途 2类 |
培养体系 | DMEM高糖培养基+20%FBS+1%三抗 | ||
培养温度 | 37℃ | 二氧化碳浓度 | 5% |
简介 | 人胰岛细胞NES2Y细胞提取于女性供体,为自发性永生化细胞系。 | ||
注释 | Registration: International Depositary Authority, European Collection of Cell Cultures (ECACC); 98081006. Characteristics: Insulin secreting. Characteristics: Has a loss of function of ATP-regulated potassium channels. | ||
STR信息 | / | ||
参考文献 | PubMed=9280302; DOI=10.1016/S0014-5793(97)00874-0 MacFarlane W.M., Cragg H., Docherty H.M., Read M.L., James R.F.L., Aynsley-Green A., Docherty K. Impaired expression of transcription factor IUF1 in a pancreatic beta-cell line derived from a patient with persistent hyperinsulinaemic hypoglycaemia of infancy (nesidioblastosis). FEBS Lett. 413:304-308(1997)
PubMed=10567373; DOI=10.1074/jbc.274.48.34059 MacFarlane W.M., Chapman J.C., Shepherd R.M., Hashmi M.N., Kamimura N., Cosgrove K.E., O'Brien R.E., Barnes P.D., Hart A.W., Docherty H.M., Lindley K.J., Aynsley-Green A., James R.F.L., Docherty K., Dunne M.J. Engineering a glucose-responsive human insulin-secreting cell line from islets of Langerhans isolated from a patient with persistent hyperinsulinemic hypoglycemia of infancy. J. Biol. Chem. 274:34059-34066(1999)
PubMed=10866047; DOI=10.2337/diabetes.49.6.953 MacFarlane W.M., O'Brien R.E., Barnes P.D., Shepherd R.M., Cosgrove K.E., Lindley K.J., Aynsley-Green A., James R.F.L., Docherty K., Dunne M.J. Sulfonylurea receptor 1 and Kir6.2 expression in the novel human insulin-secreting cell line NES2Y. Diabetes 49:953-960(2000)
Patent=US6372501 Aynsley-Green A., Lindley K.J., Docherty K., Dunne M.J., MacFarlane W.M., James R.F.L. Glucose responsive beta-cell line. Patent number US6372501, 16-Apr-2002
PubMed=21099259; DOI=10.4161/isl.1.2.9432 Adams G.G., Uddin A., Vives-Pi M., Pujol-Borrell R., James R.F.L. Characterisation of the NES2Y cell line and its use in the production of human glucose-responsive insulin producing (hGRIP) cell lines by cell-cell fusion. Islets 1:117-123(2009)
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验收细胞注意事项
1、收到人胰岛细胞NES2Y细胞,请查看瓶子是否有破裂,培养基是否漏出,是否浑浊,如有请尽快联系。
2、收到人胰岛细胞NES2Y细胞 ,如包装完好,请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,出现此状态时,请不要打开细胞培养瓶,应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止 3-5 小时左右,让细胞先稳定下,再于显微镜下观察,此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁,请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。
3、收到人胰岛细胞NES2Y细胞后,请镜下观察细胞,用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多,请离心收集细胞,接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液,使用新鲜配制的培养基,使用进口胎牛血清。刚接到细胞,若细胞不多时 血清浓度可以加到 15%去培养。若细胞迏到 80%左右 ,血清浓度还是在 10%。
4、收到人胰岛细胞NES2Y细胞时如无异常情况 ,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养基吸出,留下 5-10ML 培养基继续培养:超过 80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液,1000 转/分钟离心 3 分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
5、将培养瓶置于 37℃培养箱中培养,盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里,存放于 4℃冰箱,以备不时之需。
6、24 小时后,细胞形态已恢复并贴满瓶壁,即可传代。(贴壁细胞)将培养瓶里的培养基倒去,加 3-5ml(以能覆盖细胞生长面为准)PBS 或 Hanks’液洗涤后弃去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化,消化时间以具体细胞为准,一般 1-3 分钟,不超过 5 分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁,见细胞脱落下来,加入 3-5ml 培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之*脱落,然后将溶液吸入离心管内离心,1000rpm/5min。弃上清,视细胞数量决定分瓶数,一般一传二,如细胞量多可一传三,有些细胞不易传得过稀,有些生长较快的细胞则可以多传几瓶,以具体细胞和经验为准。(悬浮细胞)用移液管轻轻吹打瓶壁,直接将溶液吸入离心管离心即可。
7、贴壁细胞 ,悬浮细胞。严格无菌操作。换液时,换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液,37℃,5%CO2 培养。
特别提醒: 原瓶中培养基不宜继续使用,请更换新鲜培养基培养。