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简要描述:青旗(上海)生物技术发展有限公司,总部位于上海浦东新区,依托本地高校资源,逐步发展成为以生物技术为主的研发、生产、培训为一体的综合化产业平台,在标准化细胞库建立及细胞药物前端模型方面成果显著。公司生产经营原代细胞、细胞系、ELISA试剂盒、感受态细胞和HPLC检测等科研产品与服务。我们秉承对用户负责的态度,以对科研的高度严谨,以严格的质量控制,为广大生物医学科研用户提供更优质的服务!
更新时间:2021-05-27
厂商性质:生产厂家
浏览次数:468
品牌 | 其他品牌 | 货号 | BFN608006373 |
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规格 | T25培养瓶x1 1.5ml冻存管x2 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 仅供科研 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
细胞名称 | 小鼠表皮细胞JB6Cl30-7b | ||
货物编码 | BFN608006373 | ||
产品规格 | T25培养瓶x1 | 1.5ml冻存管x2 | |
细胞数量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存温度 | 37℃ | -198℃ | |
运输方式 | 常温保温运输 | 干冰运输 | |
安全等级 | 1 | ||
用途限制 | 仅供科研用途 2类 |
培养体系 | DMEM高糖培养基(Hyclone)+10%胎牛血清(Gibco)+1%双抗(Hyclone) | ||
培养温度 | 37℃ | 二氧化碳浓度 | 5% |
简介 | 小鼠表皮细胞JB6Cl30-7b细胞取自ICR小鼠,贴壁培养,不规则形态。 | ||
注释 | 倍增时间46h。 | ||
STR信息 | / | ||
参考文献 | Frizzled4在小鼠毛囊周期中的表达 , PP. 631-635 陈年,伍津津,邱伟明,唐辉,唐书谦 Keywords: Frizzled,毛囊,小鼠,Wnt,抗体 Full-Text Cite this paper Add to My Lib
Abstract: 目的探讨Wnt蛋白的受体分子Frizzled4在小鼠毛囊周期中的表达、功能及其意义。方法利用实时定量PCR、RT-PCR、Westernblot和免疫荧光等技术分别检测Frizzled4mRNA和蛋白在毛囊生长期(P1d、P3d、P8d)、退化期(P16d)和静止期(P21d)中的表达。免疫荧光技术检测Frizzled4在小鼠皮肤上皮细胞JB6cl30-7b中的定位,MTT检测用抗Frizzled4抗体处理JB6cl30-7b细胞后的增殖情况。结果在毛囊生长期早期,Frizzled4mRNA和蛋白在P1d的小鼠背部皮肤中表达明显,膜表达于Bulge、毛囊外根鞘及毛球外侧。在P3d,Frizzled4蛋白表达明显上调,主要表达于Bulge、毛囊外根鞘、内根鞘、precortex、部分毛球外侧。在生长中期(P8d),Frizzled4蛋白的表达*,集中在毛囊Bulge、外根鞘上段及内根鞘。当毛囊进入退化期(P16d),Frizzled4mRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.05),此时主要定位于Bugle。而在静止期,Frizzled4mRNA和蛋白表达(P<0.05),只有少量Frizzled4阳性细胞出现在毛囊Bulge。免疫荧光技术检测Frizzled4蛋白同样也在JB6cl30-7b细胞膜中表达。MTT结果显示与对照组相比,10μg/mL的抗Frizzled4抗体处理JB6cl30-7b细胞后光密度值明显降低(P<0.05),而20μg/mL的抗Frizzled4抗体处理后的光密度值降到(P<0.05)。结论Frizzled4在毛囊周期中的表达具有时空特异性。伴随着毛囊的生长,Frizzled4的mRNA和蛋白水平都呈现高表达,随着毛囊的退化而表达降低,直至静止期维持低表达水平。拮抗Frizzled4蛋白的作用促使细胞增殖受到明显抑制,提示Frizzled4的表达与毛囊细胞的增殖和分化相关。 |
验收细胞注意事项
1、收到小鼠表皮细胞JB6Cl30-7b细胞,请查看瓶子是否有破裂,培养基是否漏出,是否浑浊,如有请尽快联系。
2、收到小鼠表皮细胞JB6Cl30-7b细胞,如包装完好,请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,出现此状态时,请不要打开细胞培养瓶,应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止 3-5 小时左右,让细胞先稳定下,再于显微镜下观察,此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁,请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。
3、收到小鼠表皮细胞JB6Cl30-7b细胞后,请镜下观察细胞,用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多,请离心收集细胞,接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液,使用新鲜配制的培养基,使用进口胎牛血清。刚接到细胞,若细胞不多时 血清浓度可以加到 15%去培养。若细胞迏到 80%左右 ,血清浓度还是在 10%。
4、收到小鼠表皮细胞JB6Cl30-7b细胞时如无异常情况 ,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养基吸出,留下 5-10ML 培养基继续培养:超过 80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液,1000 转/分钟离心 3 分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
5、将培养瓶置于 37℃培养箱中培养,盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里,存放于 4℃冰箱,以备不时之需。
6、24 小时后,小鼠表皮细胞JB6Cl30-7b细胞形态已恢复并贴满瓶壁,即可传代。(贴壁细胞)将培养瓶里的培养基倒去,加 3-5ml(以能覆盖细胞生长面为准)PBS 或 Hanks’液洗涤后弃去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化,消化时间以具体细胞为准,一般 1-3 分钟,不超过 5 分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁,见细胞脱落下来,加入 3-5ml 培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之*脱落,然后将溶液吸入离心管内离心,1000rpm/5min。弃上清,视细胞数量决定分瓶数,一般一传二,如细胞量多可一传三,有些细胞不易传得过稀,有些生长较快的细胞则可以多传几瓶,以具体细胞和经验为准。(悬浮细胞)用移液管轻轻吹打瓶壁,直接将溶液吸入离心管离心即可。
7、贴壁细胞 ,悬浮细胞。严格无菌操作。换液时,换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液,37℃,5%CO2 培养。
特别提醒: 原瓶中培养基不宜继续使用,请更换新鲜培养基培养。